正就读中学的少年迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）意外被一只遭受放射性污染的蜘蛛咬伤，随后身体发生奇特的变化。偶然机缘，他目睹了蜘蛛侠（克里斯·派恩 Chris Pine 配音）和犯罪头目金并（列维·施瑞博尔 Liev Schreiber 配音）的战斗。为了阻止金并利用时空对撞机扰乱宇宙，蜘蛛侠最终壮烈牺牲。可未过多久，来自平行宇宙的颓废的彼德·帕克（杰克·约翰逊 Jake M. Johnson 配音）出现在迈尔斯面前。为了阻止金并的阴谋，并帮助这个帕克返回自己的宇宙，他们闯入金并的老巢。在这一过程中，二人遭到章鱼博士和徘徊者的狙击。与此同时，来自其他宇宙的女蜘蛛侠、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠、二次元蜘蛛妹相继出现。 他们合力与恶势力展开斗争……
詹姆斯·贝鲁什,马丁·科夫,克里斯蒂娜·奥乔亚,埃里克·约翰逊,查克·林德尔,Ken Shamrock,迈克尔·比斯平,恩尼斯·埃斯莫,保罗·布朗斯坦,马修·维利希,Laiko Foroughi,Nicolas Grimes,艾莉娜·宫本·杰克逊,阮朴生,Marco Caffiero,穆斯塔法·布鲁特,芬恩·麦卡格尔,凯文·凯斯,Louis Paquette,William Desrosiers
巴拉克利须那,哈莎莉·马洛特拉,Samyuktha·Menon
披查亚·尼迪裴善官
张睿 石雪婧 赵亮
弗农·威尔斯,Preet Kaur,Chandni Shah,Lindsey Marie Wilson,Jace Warren
Sabina·Mach·Sabina·Mach,Gigi·Zumbado·Gigi·Zumbado
